NIBSC 74/520 人血清蛋白(国际标准品)

本材料不适用于体外诊断。

1. 预期用途

到 1967 年，当制备人血清免疫球蛋白的标准品时，人们越来越认识到其他血清蛋白的标准品将是有用的，并且单一混合的血清制剂可以作为每种感兴趣的蛋白质的标准品。

预计大多数或所有这些蛋白质在冻干血清中极为稳定，但人们认识到，重构产品的混浊度会使其不适用于比浊法。 1974 年，从英国的捐赠者那里获得了一批 20 升的人血清，并与国际免疫学会联盟合作准备冷冻干燥。将其中的 4 升冷冻干燥并二次干燥，并标记为 74/520。

1975 年，作为一项临时措施，该制剂被确立为第一个英国人血清标准（免疫球蛋白除外），74/520，直到进行国际合作研究以确定蛋白质成分测定的有效性，以及它们的稳定性。

1978 年，世界卫生组织建立了第一个六种人血清蛋白的国际参考制剂 (IRP)。这些蛋白质是白蛋白、α-抗胰蛋白酶、α-2-巨球蛋白、铜蓝蛋白、补体 C3 和转铁蛋白。第一个 IRP 是从来自美国乔治亚州阿尔特兰塔的 85 名供体的血清库中冷冻干燥的。 IRP 和其他制剂的许多蛋白质成分，包括第一个英国人血清蛋白标准（免疫球蛋白除外）74/520 在一项国际研究中进行了交叉校准（Reimer 等人，1978 年）。因此，当 WHO 于 1978 年建立第一个 IRP 时，有足够的数据允许根据第一个 IRP 重新校准第一个英国标准，涉及三种蛋白质，α-抗胰蛋白酶、铜蓝蛋白和转铁蛋白.根据第一个 IRP，数据被认为不足以校准第一个英国标准中白蛋白和 α-2 巨球蛋白的效力。

2. 注意

NIBSC 74/520 人血清蛋白(国际标准品) 不适用于人类食物链中的人类或动物。

该制剂含有人类来源的材料，最终产品或从中提取的原材料都经过测试，发现 HBsAg、抗 HIV 和 HCV RNA 呈阴性。与所有生物来源的材料一样，这种制剂应被视为对健康有潜在危害。它应该被使用和丢弃根据您自己实验室的安全程序。此类安全程序应包括戴防护手套和避免产生气溶胶。打开安瓿或小瓶时应小心谨慎，以免割伤。

3. 单元

第一个英国标准的建立：Unitage 最初规定 1975 年，74/520 制剂被确立为第一个英国人血清蛋白标准（免疫球蛋白除外）。它最初被分配了一个单位，因此 12 种特定蛋白质中的每一种都有 1 个单位的活性存在于 0.7740 毫克的冻干粉末中。

由于在每个 74/520 安瓿中有 77.40 mg 粉末，因此每个安瓿中每种蛋白质的活性最初为 100 单位。然而，这个数字后来针对第一个 IRP 规定的五种蛋白质进行了修订。

修订后的英国第一标准的统一标准

目前的位置是在 1978 年根据新的 IRP 对第一个英国标准中的某些蛋白质进行重新校准的结果。目前的立场如下：

i) 第一版英国标准中的七种蛋白质成分不属于国际合作研究的一部分。最初在第一个英国标准中分配给这七种蛋白质的单位保持不变。这些单位是英制单位，以下七种蛋白质还没有国际单位：

Alpha-1-酸性糖蛋白 100“英制单位"/安瓿

α-1-抗糜蛋白酶"

α-2-HS糖蛋白"

气相色谱球蛋白"

血凝素"

结合珠蛋白"

前白蛋白"

ii) 1st British 3 种蛋白质成分的国际统一标准已根据第一个 IRP 进行了估算。这些蛋白质的修订单元如下： ALPHA-1-ANTITRYPSIN

1 个国际单位的 α-1-抗胰蛋白酶活性存在于 0.9197 毫克冻干安瓿中。溶解安瓿的全部内容物。该溶液将包含 84.16 国际单位的 α-1-抗胰蛋白酶活性。

4、内容

生物材料原产国：英国。

柠檬酸盐血浆由国家输血服务中心的北伦敦地区输血中心提供。血浆来自伦敦的健康成年捐赠者，每个样本都单独冷冻。在国家生物标准与控制研究所 (NIBSC) 中，通过放射免疫分析法对每个样品的一部分进行了测试，以确定其是否不含乙型肝炎相关抗原。然后将单个血浆样本送到威康研究实验室，在那里解冻和处理。通过添加氯化钙至最终浓度约为 0.014 摩尔，在室温下制备并凝结 82 个样品池。去除凝块并将血清在4oC保持过夜。第二天，它通过平均孔径为 0.45 微米的 Balston 微纤维过滤管和 Sartorius 过滤膜进行过滤。前 6 升要过滤的液体在 4oC 时被送到 NIBSC。该批次的 4 升用于制备第一个英国标准人血清蛋白（免疫球蛋白除外）74/520。

在 NIBSC 测试了冻干制剂的安瓿。在 6 个安瓿中单独估计的内容物干重为 77.40 毫克（范围 77.25-77.52 毫克 ± 0.18%）。在 0.05 mm 汞柱的压力下，在 56oC 下用 P2O5 加热 5 小时，估计 6 个安瓿的残留水分含量。损失在 0.45% 和 0.58% 之间变化，平均为安瓿内容物重量的 0.51%。测定了 3 个安瓿中气体中的氧气浓度，发现平均值为 0.11%。接种安瓿内含物的肉汤培养 5 天后，未观察到细菌生长。

标准免疫化学活性

制剂 74/520 的初步检查最初是在 NIBSC 中由德国 Behringwerke 的 W Becker 博士通过劳雷尔和/或火箭电泳进行的。发现上述蛋白质（不包括 C3）在冷冻干燥前以合理的浓度存在于合并的血清中，并且以大约相同的浓度存在于冷冻干燥的血清中。在冷冻干燥过程中未发现这些蛋白质的电泳图谱发生明显变化。

5. 存储

NIBSC 74/520 人血清蛋白(国际标准品)  未开封的安瓿瓶应在–20oC 或以下避光保存。

请注意：由于冻干材料固有的稳定性，NIBSC 可能会在环境温度下运输这些材料。

6. 开瓶指南

轻轻敲击安瓿以收集底部（标记）端的材料。确保在尝试打开之前，用金刚石或碳化钨顶端的玻璃刀锉或其他合适的工具在颈部狭窄部分对安瓿进行全面刻痕。将安瓿瓶放入安瓿瓶开启器中，将分数定位在“A"位置；如下图所示。

用布或几层薄纸围绕安瓿。握住安瓿瓶和支架并在“B"点挤压。安瓿瓶会突然打开。注意避免割伤和弹射玻璃碎片进入眼睛。注意不要从安瓿瓶中损失任何物质，也不要让玻璃掉入安瓿瓶中。安瓿开启装置的侧视图，其中包含一个准备打开的安瓿。 “A"是得分标记，“B"是施加压力的点。

7. 材料的使用

不应尝试称量冻干的任何部分重组前的材料。

使用前应立即使用标准安瓿中的内容物加入 1.0 ml 蒸馏水复溶。粉末应在室温下静置容易溶解，产生轻微的混浊溶液。