NIBSC 19/152 流感抗-A(标准品)

1. 预期用途

流感抗血清试剂 19/152 使用适当的 NIBSC 抗原试剂制备用于 H3N2 A/Kansas/14/2017 样抗原的单径向扩散测定。

使用 A/Kansas/14/2017 样病毒的纯化 HA 在绵羊 706 和 707 中制备抗血清试剂。通过用菠萝蛋白酶处理从纯化的病毒中提取 HA 抗原并通过在蔗糖梯度上沉降来纯化 (Brand, CN and Skehel, JJ, Nature, New Biology, 1972, 238, 145-147)。

2. 注意

NIBSC 19/152 流感抗-A(标准品) 不适用于人类食物链中的人类或动物。

该材料不是人或牛来源。与所有生物来源的材料一样，这种制剂应被视为对健康有潜在危害。应根据您自己实验室的安全程序使用和丢弃它。此类安全程序应包括戴防护手套和避免产生气溶胶。打开安瓿或小瓶时应小心谨慎，以免割伤。

3. 单元

没有为该材料分配单元。

4. 内容

生物材料原产国：英国。

绵羊 706 的免疫计划如下：肌肉注射一剂约 100 µg A/Kansas/14/2017 病毒 HA 和弗氏*佐剂 (FCA)，两周后给予 20 微克剂量的弗氏不*佐剂佐剂 (FIA)。一周后给予包括 FIA 在内的另外五剂 20 微克剂量的 A/Kansas/14/2017 HA。初次免疫后八周，收集血清并加入NaN3（0.05% w/v）。绵羊 707 的免疫计划如下：肌肉注射一剂约 100 µg A/Kansas/14/2017 病毒 HA 和弗氏*佐剂 (FCA)，两周后给予 20 微克剂量的弗氏不*佐剂佐剂 (FIA)。一周后，包括 FIA 在内的另外七剂 20 微克剂量的 A/Kansas/14/2017 HA 被给予。初次免疫后十周，收集血清并加入NaN3（0.05% w/v）。然后通过 APHIS 批准的灭活 FMDV 方法处理抗血清。将从绵羊 706 和 707 获得的抗血清汇集，用含有NaN3（0.05% w/v) 的 PBS 缓冲液 1:4 稀释，并装入 2ml 体积的小瓶中。

5. 存储

+2-8ºC

但是，如果打算长期储存试剂，即 > 2 年，则它们可以储存在 -20ºC。抗血清可以冷冻和解冻，对其在 SRD 测定中的使用没有任何不利影响。

6. 开瓶指南

NIBSC 19/152 流感抗-A(标准品)  小瓶有螺帽；也可能存在内部塞子。应通过逆时针旋转取下盖子。应注意防止内容物丢失。请注意：如果在取下瓶盖时有塞子，塞子应留在小瓶中或随瓶盖一起取下。

7. 材料的使用

对于 1ml 中含有 20-50 微克 HA 活性的抗原的测定，应将大约 30-40 µl 未稀释的试剂添加到 1ml 琼脂糖中。根据使用的A/Kansas/14/2017 样抗原标准或根据当地实验室条件，可能需要更改抗血清浓度