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NIBSC 18/118 HCT 15 癌症基因组(标准品)

NIBSC 18/118 HCT 15 癌症基因组(标准品)

简要描述:NIBSC 18/118 HCT 15 癌症基因组(标准品)旨在用作校准二级标准、试剂盒和测定的主要标准。

所属分类:NIBSC标准品

更新时间:2022-04-15

厂商性质:经销商

详情介绍
品牌其他品牌货号NIBSC 18/118
供货周期现货应用领域医疗卫生,生物产业

1. 预期用途

材料 18/118 是冻干、纯化的基因组 DNA (gDNA)从 HCT 15 人细胞系中提取。该材料与 PIK3CA c.1633G>A (E545K) 相关的共有变异百分比,以及每个二倍体人类基因组质量的共有变异和总 PIK3CA 拷贝数。可以通过应用计算(参见附录 I)来稀释材料,以产生 PIK3CAc.1633G>A (E545K) 变体百分比范围内的标准品。该材料旨在用作校准二级标准、试剂盒和测定的主要标准。该材料不用作运行控制。该材料经过外部实验室测试,表明适合作为下一代测序 (NGS) 和数字 PCR (dPCR) 的标准。除了 PIK3CA c.1633G>A (E545K) 临床相关变体外,该材料还包含可用于 NGS 检测验证的非临床相关变体(参见附录 II)。该材料由世界卫生组织 (WHO) 生物标准化专家委员会于 2019 年制定,作为 WHO 第一个 HCT 15 癌症基因组国际标准,NIBSC 材料代码 18/118。



2. 注意

NIBSC 18/118 HCT 15 癌症基因组(标准品) 不适用于人类食物链中的人类或动物。

该制剂含有人类来源的材料,经血清学检测发现 HIV 1 和 2 Ab/Ag 检测和 HBsAg(Hep b 表面抗原)阴性,NAT(核酸检测)检测发现 HCV 阴性。但是,不能消除活病毒存活的可能性。与所有生物来源的材料一样,这种制剂应被视为对健康有潜在危害。应根据您自己实验室的安全程序使用和丢弃它。此类安全程序应包括戴防护手套和避免产生气溶胶。打开安瓿或小瓶时应小心谨慎,以免割伤。



3. 单元

该材料在一项涉及 35 个实验室和 38 种测试方法的国际合作研究中进行了测试。从 NGS 和 dPCR 获得基因型和共有变异百分比(表 1)。最终用户能够使用基于变体和总基因拷贝数全二倍体人类基因组的稀释公式进一步稀释材料(使用野生型材料 18/164,或校准到材料 18/164 的另一种野生型基因组 DNA)

质量,以在较低的一致变异百分比范围内达到进一步的标准,从该范围内可以进行测定校准见第 7 节。


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4. 内容

生物材料原产国:英国。

编码安瓿含有大约 5 µg 从人类细胞系中提取的冻干纯化基因组 DNA。使用“盐析"方法提取 gDNA,并在冷冻干燥前在 Tris-EDTA 缓冲液 5mg/ml 海藻糖中稀释。



5. 存储

NIBSC 18/118 HCT 15 癌症基因组(标准品) 将所有未开封的冻干材料安瓿存放在 - 或以下。

请注意:由于冻干材料固有的稳定性,NIBSC 可能会在环境温度下运输这些材料。



6. 开瓶指南

DIN 安瓿瓶有一个“易开"颜色的压力点,窄的安瓿杆在此与较宽的安瓿瓶主体相连。各种类型的安瓿破碎机可商购获得。要打开安瓿,轻轻敲击安瓿以收集底部(标记)端的材料,并按照安瓿破碎器随附的制造商说明进行操作。



7. 材料的使用

在重新配制之前,不应尝试称量冻干材料的任何部分

a。如上文第 6 节所述打开安瓿瓶。

b。在室温下用 100μl 无核酸酶水复溶冻干材料。

C。使用移液器将样品转移到无核酸酶管中,确保收集最大可用量。

d。让材料在室温下复溶 1 小时,然后用移液管充分混合。 1x Tris-EDTA 缓冲液中的 DNA 浓度现在约为 50ng/µl,但建议在使用前使用自己的定量方法进行确认。不必担心材料中可能出现的白色斑点。

e.这种变体材料可以与材料 18/164(野生型)结合以产生任何选择的变体百分比的标准

F。将所需的量添加到您的检测中。材料可以进一步稀释(用无核酸酶水或合适的缓冲液),以达到适合您检测的 DNA 浓度。

G。应在同一测定中分析初级和二级标准,以将值分配给二级标准。





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