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NIBSC 16/120 基因组 JAK2 V617F(标准品)

NIBSC 16/120 基因组 JAK2 V617F(标准品)

简要描述:NIBSC 16/120 基因组 JAK2 V617F(标准品)旨在用作校准 JAK2 V617F 检测的二级标准、分析和试剂盒的主要标准。这些材料不用作运行控制。

所属分类:NIBSC标准品

更新时间:2022-04-18

厂商性质:经销商

详情介绍
品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,生物产业

1. 预期用途

该面板包括七个单独编码的安瓿,每个安瓿含有从人类细胞系中提取的冻干纯化基因组 DNA。每个主要标准品/安瓿瓶都有不同的 JAK2 V617F 定义值,作为总 JAK2 (NM_004972.3) 的百分比。该面板旨在用作校准 JAK2 V617F 检测的二级标准、分析和试剂盒的主要标准。这些材料不用作运行控制。这些材料由外部实验室测试,通过在等位基因特异性 (AS)-QPCR、数字 PCR、基于等位基因歧视的终点 PCR(包括 AS-PCR、扩增难治性突变系统-PCR (ARMS- PCR)和基质辅助激光解吸/电离飞行时间(MALDITOF)质谱分析)和下一代测序。

该小组由世界卫生组织 (WHO) 生物标准化专家委员会于 2016 年成立,作为 WHO 第一个基因组 JAK2 V617F 国际参考小组,NIBSC 代码 16/1201这些材料不得用于任何其他用途。数据分析必须集中在 JAK2 基因座上。不得尝试识别源材料捐助者。



2. 注意

NIBSC 16/120 基因组 JAK2 V617F(标准品) 不适用于人类或动物人类食物链。

对用于制备该组的细胞系进行了测试,通过 PCR 发现其对 HIV1、HTLV1、HBV 和 HCV 呈阴性。在小组的制备中使用了一种 Epstein Barr 病毒 (EBV) 转化的类淋巴母细胞系。 EBV 是英国危险病原体咨询委员会分类的第 2 类病原体。 EBV 序列可能存在于这些材料中,但 DNA 是使用蛋白质变性和去除的方案制备的,因此可能使病毒失活。但是,不能消除活病毒存活的可能性。与所有生物来源的材料一样,这种制剂应被视为对健康有潜在危害。应根据您自己实验室的安全程序使用和丢弃它。此类安全程序应包括戴防护手套和避免产生气溶胶。打开安瓿或小瓶时应小心谨慎,以免割伤。



3. 单元

该小组在一项涉及 29 个实验室和 38 种测试方法的国际合作研究中进行了测试。获得了以下 JAK2 V167F 占总 JAK2 百分比的中值;材料 15/170 的共识值低于预期(与内部液滴数字 PCR 数据相比)。值得注意的是,在材料 15/170 的 27 种(统计上合适的)定量方法中,5 种方法报告的平均值为 0%,这可能是由于该方法的检测限或低采样频率的降低。水平目标。仅来自数字 PCR 方法的结果 (n = 6),所有这些方法都报告了大于 0% 的值,显示平均值为 0.04% JAK2 V617F (±0.01%;95% 置信区间)。与材料 15/172(0% JAK2 V617F)相比,材料 15/170 明显对 JAK2 V617F 呈阳性。



4. 内容

生物材料原产国:英国和德国。

该面板包括七个单独编码的安瓿,每个安瓿含有大约 5 µg 从人类细胞系中提取的冻干纯化基因组 DNA。使用“盐析"方法提取基因组 DNA,以不同的比例组合以产生一系列 JAK2 V617F 值占总 JAK2 的百分比,并在冷冻干燥前用 5mg/ml 海藻糖在 Tris-EDTA 缓冲液中稀释。



5. 存储

将所有未开封的冻干材料安瓿存放在 -20°C 或以下。

请注意:由于冻干材料固有的稳定性,NIBSC 可能会在环境温度下运输这些材料。



6. 开店指南

DIN 安瓿瓶有一个“易开"颜色的压力点,窄的安瓿杆在此与较宽的安瓿瓶主体相连。各种类型的安瓿破碎机可商购获得。要打开安瓿,轻轻敲击安瓿以收集底部(标记)端的材料,并按照安瓿破碎器随附的制造商说明进行操作。



7. 材料的使用

NIBSC 16/120 基因组 JAK2 V617F(标准品)  在重新配制之前,不应尝试称量冻干材料的任何部分

a。如上文第 6 节所述打开安瓿瓶。

b。在室温下用 100 µl 无核酸酶水复溶每种冻干材料,在 1x Tris EDTA 缓冲液(10mM Tris,1mM EDTA)中得到纯化的基因组 DNA。

C。使用移液器将每个安瓿的全部内容物转移到无核酸酶管中。

d。让材料在室温下复溶 1 小时,并在使用前用移液管充分混合。

e.使用前测量DNA浓度;将所需的量添加到您的检测中。

F。如果将标准用于测定校准目的,请确定通过分析这些标准的观察值与预期值,为您的 JAK2 V617F 测定校正系数。有关更多详细信息,请参阅第一个 WHO 国际遗传参考小组对 BCR-ABL1 易位定量的建议校准方法

G。如果您正在校准二级标准,请在测试一级标准的同时测试此基因组 DNA,并应用相关的校正因子。有关详细信息,请参阅第一个 WHO 国际遗传参考小组对 BCRABL1 易位定量的建议校准方法

H。强烈建议在当天使用该材料重组,不储存。然而,内部分析确定重组冻干基因组 DNA 在 +4°C 下至少稳定 4 天(或在 -20°C 下 2 个月)。应注意避免与其他样品交叉污染。





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