热门搜索:PM2.5颗粒物标准品,SRM 1648a城市颗粒物,SRM 1649B城市灰尘,SRM 2786大气颗粒物,美国NIST标准品
产品展示 / products 您的位置:网站首页 > 产品展示 > 标准品 > NIBSC标准品 > NIBSC 06/202 人乳头瘤病毒16 型标准品
NIBSC 06/202 人乳头瘤病毒16 型标准品

NIBSC 06/202 人乳头瘤病毒16 型标准品

简要描述:NIBSC 06/202 人乳头瘤病毒16 型标准品用于 HPV 16 型 (HPV16) DNA 的第一个国际标准基于核酸的测定由冷冻干燥的制备物组成含有全长 HPV16 DNA 的重组质粒 pBR322 被克隆通过其*的 BamH1 站点 (Quint et al., 2006)

所属分类:NIBSC标准品

更新时间:2022-04-21

厂商性质:经销商

详情介绍
品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,生物产业

1. 预期用途

用于 HPV 16 型 (HPV16) DNA 的第一个国际标准基于核酸的测定由冷冻干燥的制备物组成含有全长 HPV16 DNA 的重组质粒 pBR322 被克隆通过其*的 BamH1 站点 (Quint et al., 2006)。该标准已在纯化的人类基因组 DNA 的背景下配制,冻干在 0.5 ml 等分试样中并储存在 -20 °C。材料经过校准涉及 19 个实验室的国际合作研究(Wilkinson 等人,2010)。国际标准包含的材料是专有的第三方,应仅用于内部校准或HPV-16扩增检测的工作标准脱氧核糖核酸。国际标准不应用于任何其他用途,使用后应丢弃。



2. 注意
NIBSC 06/202 人乳头瘤病毒16 型标准品 不适用于人类食物链中的人类或动物。

该材料含有源自 C33A 细胞的 DNA。与所有生物来源的材料一样,这种制剂应被视为对健康有潜在危害。应根据您自己实验室的安全程序使用和丢弃它。此类安全程序应包括戴防护手套和避免产生气溶胶。打开安瓿或小瓶时应小心谨慎,以免割伤。



3. 单元

HPV16 DNA 的第一个国际标准(NIBSC 代码 06/202)已规定为每安瓿 5 x 10^6 国际单位 (IU) 的单位。


可追溯性声明:

在 2008 年 1 月的一次 WHO 会议上(WHO 会议报告,2008 年)提出,HPV16 DNA 国际标准的使用说明包括用于确定所用散装材料的理论 HPV16 基因组当量 (GEq) 的计算和假设在制定国际标准时,证明 1 IU 相当于 1 GEq 用于 HPV16 DNA。因此,第一个 WHO HPV16 DNA 国际标准的最终统一仍然是 IU,而可追溯性声明将允许用户将 IU 等同于 GEq。

在新墨西哥大学 (UNM) 的 Cosette Wheeler 博士的实验室中进行了重组 HPV16 质粒储备制剂的 DNA 浓度测定。 DNA浓度通过260 nm处的吸光度以及使用Picogreen测定法(Invitrogen Corporation,USA)的分光荧光法测定。在两次 DNA 测量之间获得了 0.95 或更高的相关系数。将 10 ng HPV16 质粒 DNA/μl 提供给 NIBSC 用于配制用于随后冷冻干燥的散装材料。 UNM 实验室还向 NIBSC 提供了一份声明,表明 HPV16 的 1.0 x 1011 GEq/ml 等于 1.17 ng/μl。因此,10 ng HPV-16 质粒 DNA/μl 质粒储备液相当于 8.547 x 1011 HPV-16GEq/ml。 NIBSC 在制定第一国际标准时使用了这些数据用于 HPV 16 型 DNA。


用于 HPV 16 型 DNA 的第一个国际标准(NIBSC 代码 06/202)的散装材料配方:

在 NIBSC,根据公式制备大量 HPV16 质粒 DNA 材料:

HPV GEq/ml 散装材料 = (HPV GEq/ml 质粒原液 x 体积质粒原液)/体积散装材料。因此,HPV16 GEq/ml 散装材料 = (8.547 x 1011 HPV-16 GEq/ml 质粒原液)x(0.02223 ml HPV-16 质粒原液)/1900 ml HPV-16 散装材料 = 1.0 x 107 HPV-16 GEq/ml散装材料 HPV-16 DNA 散装材料随后以 0.5 ml 等分试样冷冻干燥。第一次将 IU 等同于 GEq 需要某些假设HPV16 DNA 的国际标准:

1) HPV16 的 1.0 x 1011 GEq/ml 等于 1.17 ng/μl。

2) 冻干后 HPV16 DNA 的活性没有损失。

3) 重组HPV-16质粒DNA准确模拟了生物样本中HPV16病毒DNA的活性。


独立计算重组 HPV-16 质粒的 GEq/ml脱氧核糖核酸。

NIBSC 还使用 BioEdit 序列比对编辑器 v7.0.5.3 (Tom Hall, Isis 制药公司,美国)。用于确定分子量的序列是用于 pBR322 的 GenBank 登录号 J01749.1 和用于 HPV16 的参考序列(登录号 K02718)。


生物编辑数据DNA分子:HPV16 Accession K02718

长度 = 7904 个碱基对

MW= 4786756.00 道尔顿,双链

DNA分子:克隆载体pBR322

长度 = 4361 个碱基对

MW= 2653867.00 道尔顿,双链

公式 HPV 质粒原液的 GEq/ml 根据公式计算:

HPV 质粒原液的 GEq/ml = (HPV 质粒原液的 DNA 浓度) x (HPV DNA 的 MW + pBR322 的 MW)-1 x (阿伏伽德罗数) 其中阿伏伽德罗数 = 6.022x1023 分子/mol

根据以下公式计算大量 HPV DNA 材料的 GEq/ml:

HPV GEq/ml 散装材料 = (HPV GEq/ml 质粒原液 x 体积质粒原液)/体积散装材料。计算 将重组 HPV16 质粒原液以 10 ng/μl 的浓度提供给 NIBSC。


使用上面显示的 MW 测定,HPV16 质粒原液的 GEq/ml 为:

= (10 x 10-9g/μl) x (mol/(7440623 g) x (6.022x1023 分子/mol)

= 8.093 x 108 分子/μl

= 8.093 x 1011 分子/毫升

= 8.093 x 1011

HPV16 GEq/ml

将 22.23μl 重组 HPV16 质粒原液稀释至终体积为 1900ml,因此,HPV-16 GEq/ml 散装材料 = (8.093 x 1011 HPV16 GEq/ml 质粒原液) x (0.02223 ml HPV16 质粒原液) / 1900 ml HPV16 散装材料 = 0.947 x 107 HPV16 GEq/ml 散装材料



4. 内容

生物材料原产国:英国。

每个安瓿含有相当于 0.5 ml HPV16 的冻干粉

质粒 DNA 在 10mM Tris 缓冲液 pH7.4 中含有 1mM EDTA、5 mg/ml 海藻糖和 ~1 x 106 人 Geq/ml 源自 C33a 细胞。



5. 存储

NIBSC 06/202 人乳头瘤病毒16 型标准品  收到时,安瓿瓶应存放在 -20 °C 或以下。

请注意:由于冻干材料固有的稳定性,NIBSC 可能会在环境温度下运输这些材料。



6. 开瓶指南

DIN 安瓿瓶有一个“易开"颜色的压力点,窄的安瓿杆在此与较宽的安瓿瓶主体相连。各种类型安瓿破胶剂是市售的。打开

安瓿,轻轻敲击安瓿以收集底部(标记)端的材料,并按照安瓿破碎机提供的制造商说明进行操作。




7. 材料的使用

在重新配制之前,不应尝试称量冻干材料的任何部分。

HPV16 DNA 的第一个国际标准包含高拷贝数模板。 HPV16质粒的风险很高。打开玻璃安瓿时通过雾化造成 DNA 污染。材料必须在单独的实验室环境中打开和处理,远离试剂、实验室器具和样品等其他预放大组件。该材料以冻干形式提供,使用前应在 0.5 ml 无菌无核酸酶水中复溶。确保安瓿的内表面被添加的水润湿,以便重组粘附在玻璃上的任何冻干材料颗粒。重组材料的最终浓度为 1 X 10^7 IU/mL。重组材料适用于校准内部或工作标准,以扩增和检测 HPV16 DNA。该材料不适用于校准或评估提取、沉淀或离心程序。 NIBSC 可以为在提取步骤无法与扩增步骤分离的分析中使用 HPV16 DNA 国际标准(例如进样、应答平台)提供指导。该材料未针对人类 DNA 核酸扩增技术进行校准。





留言询价

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
  • 联系电话电话
  • 传真传真QQ:1694406561
  • 邮箱邮箱allen.chen@srmcas.com
  • 地址公司地址东莞市万江区金丰大厦1105
© 2022 版权所有:东莞市百顺生物科技有限公司   备案号:粤ICP备2021174422号   sitemap.xml   管理登陆   技术支持:化工仪器网       
  • 公众号二维码

联系我们

contact us

扫一扫,关注我们

返回顶部