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NIBSC92/658木瓜蛋白酶制剂用于抗D标准品

NIBSC92/658木瓜蛋白酶制剂用于抗D标准品

简要描述:NIBSC92/658木瓜蛋白酶制剂用于抗D标准品不适用于人类食物链中的人类或动物。

所属分类:NIBSC标准品

更新时间:2022-04-12

厂商性质:经销商

详情介绍
品牌其他品牌货号NIBSC92/658
供货周期现货应用领域医疗卫生,生物产业

1. 预期用途

这些材料代表国际输血协会/国际血液学标准委员会 (ISBT/ICSCH) 分发。

任何酶制剂的整体性能是其蛋白水解效力及其使用方法的产物。特定酶制剂的功效应通过真阳性反应的敏感性和在推荐的技术中实现的假阳性反应的敏感性来判断。木瓜蛋白酶批次 92/658 相当于以前的木瓜蛋白酶批次 94/676分发用于此用途。使用参考抗 D 91/562 和六种惰性血清(2 组 A、2 组 B 和 2 组 O ),在两阶段参考技术中收集至少四个 O R1r 组血液样本。抗 D 91/562 不能用作血型试剂。



2. 注意

NIBSC92/658木瓜蛋白酶制剂用于抗D标准品 不适用于人类食物链中的人类或动物。

91/562 制剂含有人源材料,经 PCR 检测发现 HBsAg、HIV 抗体、HCV 抗体和 HCV RNA 均为阴性。制剂 92/658 不含人源材料。与所有生物来源的材料一样,这种制剂应被视为对健康有潜在危害。应根据您自己实验室的安全程序使用和丢弃它。此类安全程序应包括戴防护手套和避免产生气溶胶。打开安瓿或小瓶时应小心谨慎,以免割伤。



3. 单元

不适用



4. 内容

生物材料原产国:英国。



5. 存储

将未开封的安瓿瓶存放在 -20oC 或以下。

请注意:由于冻干材料固有的稳定性,NIBSC 可以在环境温度下运输这些材料。



6. 开瓶指南

轻轻敲击安瓿以收集底部(标记)端的材料。确保在尝试打开之前,用金刚石或碳化钨顶端的玻璃刀锉或其他合适的工具在颈部狭窄部分对安瓿进行全面刻痕。将安瓿瓶放入安瓿瓶开启器中,将分数定位在“A"位置;如下图所示。用布或几层薄纸围绕安瓿。握住安瓿瓶和支架并在“B"点挤压。安瓿瓶会突然打开。注意避免割伤和弹射玻璃碎片进入眼睛。小心不要从安瓿瓶中丢失任何材料,并且不要让玻璃落入安瓿瓶中。安瓿瓶开启装置的侧面视图包含一个准备打开的安瓿瓶。 “A"是得分标记,“B"是施加压力的点。

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7. 材料的使用

NIBSC92/658木瓜蛋白酶制剂用于抗D标准品 在重新配制之前,不应尝试称量冻干材料的任何部分

a) 冻干材料的重构

按如下方法重新配制每个安瓿中的全部内容物:- 木瓜蛋白酶 (92/658) – 加入 2ml 无缓冲的 0.15M NaCl Anti-D (91/562) – 加入 1ml 蒸馏水/去离子水 将安瓿置于室温 (19- 25oC) 15 分钟,不要摇晃。然后,轻轻搅拌后,重构的材料应在 2-6 oC 下储存并在 24 小时内使用。

b) 从至少四个合并的 O R1r 组血样中等比例制备一池经过洗涤的浓缩红细胞。

c) 将两份复溶的参考木瓜蛋白酶制剂 (92/658) 与一份浓缩红细胞混合,并在 37oC 下孵育 15 分钟。

d) 用磷酸盐缓冲盐水(0.15M NaCl 中的 10mM pH 7.2 磷酸盐缓冲液)洗涤处理过的细胞 3 次。在 PBS 中将处理过的细胞重新悬浮至 3% (v/v)。

e) 在含有 2% (w/v) 牛血清白蛋白的 PBS 中制备从纯到 1/512 的重组参考抗 D 91/562 的加倍稀释系列。

f) 在玻璃管中混合一体积 3% 处理过的细胞与一体积参考抗 D 和一体积 PBS。对 Anti-D 的每次稀释重复此操作。

g) 对于六种惰性血清中的每一种(A 组 2 个,B 组 2 个,O 组 2 个),将 1 体积 3% 处理过的细胞与 1 体积惰性血清和 1 体积 PBS 混合。

h) 在 37oC 下孵育 15 分钟。

i) 以 500rcf 离心管 15 秒。

j) 轻轻重悬细胞并评估凝集程度宏观上。

k) 平行地,用抗 D 的滴定系列测试汇集的细胞91/562 在测试方法中使用测试酶。

l) 评分反应等级如下:- 评分观察

C 12 细胞按钮在一个丛中

+++ 10 个细胞按钮脱落成几个大块

++ 8 细胞纽扣脱落成许多小团块

+ 5 个细胞按钮脱落成颗粒状但明确的团块

(+) 3 单元格按钮脱落变成细小的颗粒

0  0 细胞按钮脱落成单独的团块

m) 将每次滴定的反应分数相加,并将每种酶的惰性血清反应分数相加。




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